Come calcolare i CFU dalla diluizione

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Autore: John Stephens
Data Della Creazione: 25 Gennaio 2021
Data Di Aggiornamento: 27 Aprile 2024
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CFU sta per Colony Forming Units, un termine di microbiologia utilizzato per quantificare il numero di batteri presenti in una soluzione. A seconda della concentrazione del campione, è necessario eseguire più diluizioni e applicare i diversi campioni su piastre di Petri. Se hai troppe colonie batteriche, sono difficili da contare e se ce ne sono troppo poche, il campione potrebbe non essere rappresentativo. È generalmente una buona idea placcare la soluzione originale, quindi una diluizione 1/10 (1 parte di soluzione, 9 parti di soluzione salina), una diluizione 1/100 e possibilmente una diluizione 1/1000.

Calcolo dei CFU dalla diluizione batterica

    Esegui un conteggio preliminare di ogni piatto una volta incubati i batteri, che di solito richiede uno o due giorni. Conta solo singole colonie, che dovrebbero essere punti distinti e isolati, non un'intera massa di colonie diverse cresciute insieme. Scegli il piatto che ha più di 30 di queste colonie ma meno di 300.

    Conta il numero di singole colonie. Questo è il numero CFU della tua diluizione - dovrai determinare un semplice calcolo per determinare il CFU del campione originale. Per questo esempio, usa un'ipotetica piastra contenente 46 colonie.

    Determina la dimensione della diluizione che hai usato. (Idealmente, hai etichettato le capsule di Petri in anticipo.) Per questo esempio, mescola 1 ml di coltura batterica con 99 ml di soluzione salina. Questa è una diluizione 1/100.

    Moltiplica il grado di diluizione per la quantità effettivamente placcata. Se hai applicato 0,1 mL di diluizione 1/100 sull'agar, moltiplichi 0,1 x 1/100, per un risultato di 1/1000 o 0,001.

    Dividi il CFU della diluizione (il numero di colonie che hai contato) per il risultato del passaggio 4. Per questo esempio, calcoli 46 ÷ 1/1000, che è lo stesso di 46 x 1.000. Il risultato è 46.000 CFU nel campione originale.