Un enzima è una proteina che catalizza (aumenta la velocità di) reazioni chimiche. La temperatura ottimale della maggior parte degli enzimi, o la temperatura alla quale gli enzimi facilitano al meglio le reazioni, è compresa tra 35 e 40 gradi Celsius. L'aumento della temperatura all'interno di questa finestra aumenta la velocità di reazione, perché eccita le molecole e aumenta la velocità con cui gli enzimi / reagenti si scontrano e reagiscono per produrre il prodotto. Tuttavia, l'aumento eccessivo della temperatura può denaturare l'enzima e impedirne il funzionamento.
Determinare la temperatura ottimale dell'enzima riscaldando la reazione di quantità infinitesime e prelevando piccoli campioni della reazione, per determinare quando si verifica la velocità massima di produzione del prodotto.
Seleziona un metodo Determina come misurerai la concentrazione del tuo prodotto in vari punti dell'esperimento. Ad esempio, è possibile misurare la concentrazione di molti prodotti usando uno spettrofotometro e calcolando la concentrazione dall'assorbanza, oppure misurando la fluorescenza e calcolando la concentrazione dalla fluorescenza.
Imposta il tuo esperimento. Metti i reagenti e l'enzima in un piccolo contenitore con un coperchio, come una fiala di scintillazione. La reazione avrà inizio. Posizionare la fiala di scintillazione in un becher più grande di acqua a temperatura ambiente. Posizionare il becher su una piastra di riscaldamento. Posizionare un termometro all'interno del becher. Ciò consente di misurare la temperatura della reazione in vari punti.
Prelevare un campione di 100 microlitri della reazione a temperatura ambiente, a circa 25 gradi Celsius. Accendi la piastra riscaldante. A varie temperature tra 30 e 40 gradi Celsius (30,5, 31, 31,5, ecc.), Prelevare campioni da 100 microlitri della reazione.
Determina la concentrazione del tuo prodotto ad ogni temperatura. Quando la temperatura supera i 40 gradi Celsius, vedrai una diminuzione della velocità con cui il substrato viene convertito in prodotto, perché l'enzima viene denaturato. Il punto in cui il prodotto viene prodotto alla massima velocità è il punto in cui la temperatura è al suo massimo.