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HPLC offre un metodo rapido, automatizzato e altamente accurato per identificare determinati componenti chimici in un campione, ma può essere costoso, complesso e non funziona per tutti i campioni. I laboratori medici, forensi, ambientali e di produzione utilizzano la tecnica per quantificare e separare i prodotti chimici in un campione. HPLC presenta sia vantaggi che svantaggi rispetto ad altre tecniche.
HPLC e tecniche simili
Come altre forme di cromatografia, l'HPLC consente la separazione dei componenti chimici attraverso l'uso di una fase mobile e una fase stazionaria. La fase mobile è liquida e la fase stazionaria è solida. Poiché i diversi componenti si muovono a velocità diverse, si separano l'uno dall'altro. Le tecniche alternative includono l'elettroforesi capillare, in cui le sostanze migrano attraverso soluzioni in un campo elettrico e altri metodi cromatografici come l'estrazione in fase solida, la gascromatografia e la cromatografia su strato sottile.
Velocità, efficienza e precisione
Rispetto ad altre tecniche cromatografiche, come il TLC, l'HPLC è estremamente rapido ed efficiente. Usa una pompa, piuttosto che la gravità, per forzare un solvente liquido attraverso un materiale adsorbente solido, con diversi componenti chimici che si separano mentre si muovono a velocità diverse. Il processo può essere completato in circa 10-30 minuti e offre un'alta risoluzione. È preciso e altamente riproducibile. Poiché è ampiamente automatizzato, è possibile eseguire corse HPLC di base con una formazione minima.
Costo e complessità
Nonostante i suoi vantaggi, l'HPLC può essere costoso e richiedere grandi quantità di sostanze organiche costose. Tecniche come l'estrazione in fase solida e l'elettroforesi capillare possono essere più economiche e persino più veloci, in particolare per l'analisi in buone pratiche di fabbricazione. Sebbene sia relativamente semplice utilizzare i metodi HPLC esistenti, può essere complesso risolvere i problemi o sviluppare nuovi metodi. Ciò è in gran parte dovuto alla matrice di diversi moduli, colonne e fasi mobili.
Sensibilità e risoluzione
In generale, HPLC è versatile ed estremamente preciso quando si tratta di identificare e quantificare i componenti chimici. Con molti passaggi, la precisione dell'HPLC dipende in gran parte dal processo automatizzato e quindi altamente riproducibile. L'HPLC ha una bassa sensibilità per alcuni composti e alcuni non possono essere rilevati poiché vengono assorbiti irreversibilmente. Le sostanze volatili sono meglio separate mediante gascromatografia.