Contenuto
- Migliore visualizzazione
- Identificazione e classificazione
- Rilevazione della vitalità
- Identificazione delle strutture cellulari
I microbiologi studiano le caratteristiche di microrganismi come alghe, protozoi, batteri, funghi e virus usando un microscopio. Mentre alcuni organismi come i protozoi e le cellule di lievito sono facili da osservare usando un supporto umido, le cellule batteriche richiedono colorazione. Gli scienziati hanno sviluppato diversi metodi come la colorazione di Gram, la colorazione acido-rapida e la colorazione fluorescente per una migliore visualizzazione delle cellule batteriche e delle strutture cellulari. Utilizzando tali metodi di colorazione, è possibile identificare le caratteristiche strutturali che aiutano a classificare i batteri.
Migliore visualizzazione
Gli organismi batterici sono così piccoli che la maggior parte di essi sono visibili solo al microscopio con un potere di ingrandimento di 1000X. Tuttavia, il semplice ingrandimento delle dimensioni non fornisce un grado sufficiente di chiarezza, pertanto i batteri devono quindi essere colorati prima dell'osservazione per fornire la chiarezza necessaria per la visualizzazione.
Identificazione e classificazione
La colorazione dei batteri per distinguere i tipi di batteri è nota come colorazione differenziale. La colorazione di Gram è una di queste colorazioni differenziali che distingue i batteri in base al contenuto della loro parete cellulare. In questo metodo, le cellule batteriche reagiscono con una macchia di cristallo viola per assumere un colore viola. Con l'aggiunta di un agente decolorante, alcune cellule batteriche perdono colore mentre altre no. Aggiungendo la colorazione alla safranina, le cellule decolorate assumono la macchia in modo che appaia rossa mentre le cellule batteriche che non hanno perso colore rimangono viola. Le cellule batteriche che assumono il colore rosso sono chiamate organismi Gram negativi e quelle che non assumono il colore sono classificate come organismi Gram positivi. La colorazione di Gram fornisce un metodo rapido per l'identificazione iniziale dei batteri coinvolti nelle infezioni. Allo stesso modo, la procedura di colorazione acido-veloce aiuta a identificare in modo specifico gli organismi appartenenti alla classe di batteri chiamati micobatteri, come il tubercolosi del micobatterio.
Rilevazione della vitalità
Nei campioni di colture batteriche, è spesso importante rilevare la presenza di cellule batteriche viventi. Metodi di colorazione come la colorazione fluorescente aiutano a identificare se le cellule di coltura sono vitali o meno. I batteri viventi hanno la capacità di convertire la colorazione 5-ciano-2,3-ditolil cloruro di tetrazolio (CTC) in un colorante che mostra una fluorescenza rossa. Pertanto, quando le colture colorate con CTC emettono tale fluorescenza, indica la presenza di batteri vitali. Lo ioduro di propidio è una macchia che agisce solo sulle cellule non viventi che possiedono membrane danneggiate e, pertanto, è utile per identificare le cellule batteriche morte.
Identificazione delle strutture cellulari
La colorazione fornisce un metodo per visualizzare chiaramente diverse strutture cellulari. Ad esempio, il metodo di colorazione Fuelgen consente l'identificazione del nucleo all'interno delle cellule batteriche mentre la colorazione di Albert è utile nella visualizzazione di granuli metacromatici. Allo stesso modo, la tecnica di impregnazione con argento consente l'identificazione di spirochete. I flagelli sono facili da osservare quando macchiati con la macchia di Ryu. La colorazione verde della malachite aiuta a identificare le spore batteriche.