Tecniche di isolamento per un piatto a strisce

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Autore: Randy Alexander
Data Della Creazione: 2 Aprile 2021
Data Di Aggiornamento: 18 Novembre 2024
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Contenuto

Sebbene non possano essere visti ad occhio nudo, i batteri sono ovunque. Esistono nel cibo, nel suolo, nell'acqua, nelle superfici all'interno delle nostre case e nei e sui nostri corpi. I batteri esistono generalmente in popolazioni miste. L'isolamento di un batterio specifico da altre specie batteriche in un dato campione consente ai microbiologi di studiare la sua struttura e funzione, le caratteristiche utilizzate nella sua identificazione. I microbiologi isolano frequentemente i batteri utilizzando una delle diverse tecniche di placche a strisce.

Utensili

Un ciclo di inoculo viene utilizzato per trasferire microrganismi. È costituito da un filo di nicromo o platino con un piccolo anello circolare ad un'estremità. L'altra estremità è dritta e scivola in una maniglia. Sono anche disponibili anelli di inoculo monouso in plastica. I batteri possono essere isolati solo se crescono. I microbiologi coltivano batteri per l'isolamento della piastra striata in piastre di Petri poco profonde e rotonde riempite con un mezzo solido, chiamato agar. L'agar imita l'ambiente in cui i batteri crescono naturalmente. I piatti pieni di materiale sono sterili e coperti per impedire la crescita di organismi indesiderati. Durante l'isolamento della piastra di striatura, l'anello di inoculo viene ripetutamente sterilizzato nella fiamma di un bruciatore Bunsen.

Principio

La tecnica della piastra a strisce è il metodo più popolare per isolare batteri specifici da un campione contenente una miscela di microrganismi. La tecnica essenzialmente diluisce il numero di organismi e ne riduce la densità. Permette ai microbiologi di distinguere e isolare singole colonie batteriche. Una colonia è un ammasso visibile di batteri. Tutti i batteri in una singola colonia provengono dalla stessa cellula batterica. Di conseguenza, le singole colonie sono colonie "pure". La colonia pura viene trasferita su un'altra piastra per produrre una coltura pura costituita da un tipo di batteri.

Procedura

Se eseguito correttamente, l'isolamento della piastra striata assottiglia un campione e consente alle singole cellule batteriche di svilupparsi in colonie isolate. Un microbiologo inizia sterilizzando il ciclo di inoculo in una fiamma. Raffredda il loop toccandolo sull'agar, quindi immerge il loop nel campione e lo diffonde avanti e indietro per coprire una sezione della piastra. Sterilizza il ciclo, lo raffredda e inocula una seconda sezione adiacente della piastra trascinando il circuito attraverso la prima sezione più volte e coprendo la seconda sezione con un movimento a zig-zag. Questo raccoglie un piccolo numero di batteri dalla prima sezione e li trasferisce nella seconda sezione. Il numero di volte in cui questa procedura di base viene ripetuta dipende dal metodo della piastra a strisce utilizzato. Nonostante il metodo, il campione originale viene utilizzato per inoculare solo la prima sezione della piastra.

Metodo del piatto a strisce

I metodi delle piastre di striatura variano in base al numero di sezioni di agar striate. Il metodo T-streak utilizza tre sezioni: la metà superiore e due sezioni inferiori di dimensioni uguali. L'inoculo iniziale viene posizionato nella metà superiore della piastra. I batteri vengono trascinati dalla sezione superiore a una delle sezioni inferiori, quindi da quella sezione inferiore all'altra. Nel metodo del quadrante, vengono striate quattro sezioni di uguali dimensioni. Il metodo di strisciamento continuo in genere prevede l'inoculo della metà superiore della piastra, la sua rotazione di 180 gradi e l'inoculo dell'altra metà della piastra senza sterilizzare il circuito o trascinare i batteri dalla sezione precedente.